生物帮SEC-MALS是与多角度光散射结合的尺寸排阻色谱法。SEC组件由HPLC或FPLC泵和SEC色谱柱以及紫外线吸收检测器组成。注入等分试样的溶液，该溶液通常包含不同蛋白质种类的混合物，并流经填充柱。
当大小排阻色谱柱根据其大小(流体动力学半径)分离蛋白质时，溶液进入UV检测器，该检测器测量每个洗脱级分的UV吸收，生成色谱图。
可以分析色谱图中的每个洗脱峰以确定峰高，形状和洗脱体积，因此我们可以获得有关原始混合物中蛋白质的一些信息，例如其丰度，均一性和分子量估算。但是，为了获得更定量的分子量和同质性信息，样品将进入光散射检测器。
我们的实验室使用Wyatt Technology的miniDAWN MALS仪器与同样来自Wyatt的Optilab示差折光率(dRI)检测器相结合。miniDAWN是一种三角度光散射检测器，它可以确定几百道尔顿到一千万道尔顿的分子量，还可以测量10到50 nm的分子大小(均方根半径)。
dRI检测器可测量相对于纯缓冲液的折光率变化，然后对其进行分析以确定我们蛋白质的浓度。它与UV检测器相似，但好处是无需知道哪种蛋白质正在洗脱或每种类型的吸收系数，因为几乎所有蛋白质的dRI响应都几乎相同。分子量的MALS分析需要光散射和浓度数据。
现在，所有这些系统都连接到计算机，我们在其中收集，可视化，处理和分析数据。我们使用同样来自Wyatt的ASTRA软件。它是用户友好的并且易于使用。一经掌握，ASTRA中的数据处理大约需要五到十分钟，这是我们SEC-MALS设置中的最后一个组件。
